Firma:                Pickering

Modell:              PCX 5200

Kommentar:      Dokumente deut.

Technische Daten

CE-Zeichen

Gasversorgung für bis zu vier Flaschen mit vorgeregeltem Reduzierventil (Eingangsdruck 1 – 6 bar, Enddruck 4 – 6 psi), Absperrhahn und Überdruckventil (8 psi).

Reagenzflaschen mit Saran ^â -Schläuchen und Kunststoffüberzug zugelassen für einen Überdruck bis 1 bar.

Mikroprozessorkontrolle der Temperaturen. RS232-Schnittstelle für Datenabfrage und Kontrolle des Systems durch PC (Software muß durch Anwender erstellt werden).

Verwendete Materialien

Folgende Materialien kommen mit Eluenten und Reagenzlösung in Kontakt.

PCX5200 :

Einstieg in die Nachsäulenderivatisierung

Die Technik der Nachsäulenderivatisierung erhöht bei vielen HPLC-Applikationen die Sensitivität bzw. die Selektivität der Methode.

Manche Substanzen sind für die gängigsten Detektoren (UV/VIS- und Fluoreszenzdetektoren) kaum oder gar nicht "sichtbar". Der Trick besteht darin, nach der analytischen Säule (!) den Analyten "online" in einer chemischen Reaktion umzusetzen. Das Produkt besitzt danach physikalisch-chemische Eigenschaften, die es für die Detektoren "sichtbar" werden lassen. Das kann z.B. die Erhöhung des Extinktionskoeffizienten sein oder das Entstehen von Eigenfluoreszenz. Steigerungen in der Sensitivität von mehreren Größenordnungen sind dabei möglich.

Manche Reagenzien reagieren zudem sehr selektiv, so daß nur bestimmte Substanzen umgesetzt werden und anschließend mit größerer Empfindlichkeit bestimmt werden können.

In einer komplexen Matrix kann dies durch eine höhere Sensitivität selbst erreicht werden bzw. die Derivate werden nun unter Bedingungen detektiert, wo Matrixeffekte nicht mehr oder kaum noch stören, z.B. UV-Detektion im langwelligen Bereich.

Daß ionische Substanzen wie z.B. Aminosäuren erst nach der Säule derivatisiert werden können, da sie sich nur underivatisiert hochselektiv auf Ionenaustauschersäulen trennen lassen, ist ebenfalls ein Beispiel für eine Selektivitätssteigerung, die nur durch die Technik der Nachsäulenderivatisierung möglich wird.

Wie funktioniert die Nachsäulenderivatisierung?

Im Nachsäulenderivatisierungssystem wird das von der HPLC-Säule kommende Eluens mit einer Reagenzlösung gemischt.

Normalerweise fließt die Mischung dann durch einen Reaktor um genügend Zeit für eine komplette oder doch zumindest reproduzierbar ablaufende chemische Reaktion des Analyten zu haben. Handelt es sich um eine langsame Reaktion (> 1 min), kann zur Beschleunigung die Temperatur im Reaktor erhöht werden. Manche Derivatisierungen benötigen auch die Zugabe mehrerer Reagenzien nacheinander.

Schließlich passiert der Eluens/Reagenz-Strom den Detektor (gewöhnlich UV/VIS- oder Fluoreszenzdetektor).

Schematischer Aufbau eines Nachsäulenderivatisierungssystems

Theoretisch benötigt man also zum Aufbau eines Nachsäulenderivatisierungssystems lediglich Förderpumpen für den Eluenten und das Reagenz, ein T-Stück und eine Reaktionsschleife, die nötigenfalls mit einem Thermostaten thermostatisiert wird. Daß in der Praxis aber viel mehr dazugehört, können Sie auf der Seite Technik der Nachsäulenderivatisierung nachlesen.

Weitere Vorteile der Nachsäulenderivatisierung :

• Als "online"-Technik bietet sich die Nachsäulenderivatisierung vor allem für Routinemethoden an
• Die Trennung wird nicht durch Reagenzienüberschuß gestört, da die Zugabe erst nach der Säule erfolgt
• Die Derivatisierung muß nicht vollständig sondern nur reproduzierbar ablaufen
• Verschiedene Derivate einer Substanz ergeben dennoch nur ein Signal
• Aufgrund höherer Selektivität wird das Clean-up der Proben vereinfacht und damit Zeit und Geld gespart
• Die Verwendung mehrerer Detektoren (vor und nach der Derivatisierung) ist möglich

Im PCX5200 sind folgende Funktionen bzw. Bauteile integriert:

• Reagenzförderung
• Thermostatisieren des Reaktors
• Thermostatisieren der analytischen Säule
• Sicherheitseinrichtungen